第三步： 冰箱冷藏
試劑和DNA樣本充分混合
取樣完成后，要將DNA 的提取物放到冰箱冷藏備用。等提取物冷卻后，再拿出一個(gè)更小的試管，這個(gè)新試管當(dāng)中有從試劑盒中調(diào)配的試劑。
這是最為費(fèi)錢的一步，因?yàn)樵噭┖惺沁M(jìn)口的，每次加入的試劑費(fèi)用就要數(shù)百元。在進(jìn)入加樣區(qū)之前，實(shí)驗(yàn)人員先是打開了紫外線消毒燈。“現(xiàn)在要對(duì)整個(gè)房間進(jìn)行消毒，確保加樣房間沒(méi)有任何的病菌及粉塵等，實(shí)驗(yàn)者也盡量不要說(shuō)話。” 實(shí)驗(yàn)人員提醒道。
試劑里邊包括酶、引物等試劑，每個(gè)試管要加入0.2微升。加入試劑后，要將小試管放入小的混合器，讓試劑和DNA樣本充分混合。
第四步：擴(kuò)增
DNA提取物不斷繁殖分裂
為了能達(dá)到檢測(cè)需求的量，要把小試管放入一個(gè)叫做擴(kuò)增儀的儀器。把試管放入擴(kuò)增儀后，里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。
在一般情況下，經(jīng)過(guò)2-3個(gè)小時(shí)的擴(kuò)增，DNA提取物的量就能達(dá)到檢測(cè)量。也就是說(shuō)，要真正進(jìn)行DNA 檢測(cè)、比對(duì)了。
第五步：檢測(cè)
提取16個(gè)位點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)
檢測(cè)是在一個(gè)叫做310熒光自動(dòng)測(cè)序儀當(dāng)中進(jìn)行的，這種設(shè)備非常先進(jìn)，把擴(kuò)增完的小試管放入儀器后，設(shè)備會(huì)自動(dòng)從試管中提取DNA提取物，然后自動(dòng)選擇DNA位點(diǎn)，分析染色體。在一般情況下，設(shè)備會(huì)自動(dòng)提取16個(gè)位點(diǎn)，然后，系統(tǒng)自動(dòng)將需要做親子鑒定的兩個(gè)樣本進(jìn)行自動(dòng)比對(duì)。
根據(jù)遺傳學(xué)原理，如果所有的位點(diǎn)遺傳信息都能匹配成功，我們也就能大概說(shuō)，這對(duì)父子或者母子是親子關(guān)系。即便有一兩個(gè)位點(diǎn)不能成功匹配，在一般情況下，也能作出否定的結(jié)論。“每個(gè)人都會(huì)有兩條染色體，一條是父親給予的，另一條是母親給予的。在同一個(gè)點(diǎn)位上也會(huì)出現(xiàn)兩條相同的數(shù)值，一個(gè)數(shù)值來(lái)自母親，另一個(gè)數(shù)值來(lái)自父親。如果孩子有的數(shù)值父親和母親的都沒(méi)有，那么他們就很有可能不是親子關(guān)系。”當(dāng)然，這是最簡(jiǎn)單、最直觀的看法，要判斷孩子是否是親生，還要經(jīng)過(guò)更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠?jì)算。
計(jì)算時(shí)，有個(gè)親權(quán)指數(shù) (PI) 計(jì)算，因?yàn)樵谠摴筋愃朴冢╬除以p+1）的模式，這個(gè)模式?jīng)Q定其結(jié)果不可能是整數(shù)。而且，因?yàn)槭郎蠜](méi)有絕對(duì)相同的DNA，因此大概只能算出約99.9%的準(zhǔn)確率。
